Isolation and Quantification of Zika Virus from Multiple Organs in a Mouse.

عزل فيروس زيكا وتقديره كمياً من أعضاء متعددة في الفأر.

Clicks: 263
ID: 33021
2019
Article Quality & Performance Metrics
Overall Quality
Not rated
Combines reader engagement with the AI quality analysis. This article has not been analysed, so there is no overall score — reader engagement is measured and shown alongside.
AI Quality Assessment
Not analyzed
Readership in this journal
Steady

Ranked #49 of 62 articles by views in Journal of visualized experiments : JoVE

Most read Least read

Bar heights use a square-root scale.

Mint this article as an NFT
Not yet minted

Create a permanent, verifiable on-chain record of this article on the Scimatic Network. The NFT is held in your Journament account, and you can withdraw it to your own wallet at any time.

5 SUSD one-off · no wallet required
Sign in to mint
Abstract
The methods being presented demonstrate laboratory procedures for the isolation of organs from Zika virus infected animals and the quantification of viral load. The purpose of the procedure is to quantify viral titers in peripheral and CNS areas of the mouse at different time points post infection or under different experimental conditions to identify virologic and immunological factors that regulate Zika virus infection. The organ isolation procedures demonstrated allow for both focus forming assay quantification and quantitative PCR assessment of viral titers. The rapid organ isolation techniques are designed for the preservation of virus titer. Viral titer quantification by focus forming assay allows for the rapid throughput assessment of Zika virus. The benefit of the focus forming assay is the assessment of infectious virus, the limitation of this assay is the potential for organ toxicity reducing the limit of detection. Viral titer assessment is combined with quantitative PCR, and using a recombinant RNA copy control viral genome copy number within the organ is assessed with low limit of detection. Overall these techniques provide an accurate rapid high throughput method for the analysis of Zika viral titers in the periphery and CNS of Zika virus infected animals and can be applied to the assessment of viral titers in the organs of animals infected with most pathogens, including Dengue virus.
تستعرض الطرق المُقدَّمة إجراءاتٍ مختبرية لعزل الأعضاء من الحيوانات المصابة بفيروس زيكا والقياس الكمي للحمل الفيروسي. ويتمثل الهدف من هذا الإجراء في القياس الكمي للعيارات الفيروسية في المناطق المحيطية والجهاز العصبي المركزي لدى الفئران في نقاط زمنية مختلفة بعد الإصابة، أو في ظل ظروف تجريبية متباينة؛ وذلك لتحديد العوامل الفيروسية والمناعية التي تنظم العدوى بفيروس زيكا. كما تتيح إجراءات عزل الأعضاء الموضحة إمكانية القياس الكمي بواسطة مقايسة تشكيل البؤر (focus forming assay)، إلى جانب تقييم العيارات الفيروسية عبر تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR). وقد صُممت تقنيات عزل الأعضاء السريعة هذه للحفاظ على عيار الفيروس. ويسمح تحديد العيار الفيروسي كمياً بواسطة مقايسة تشكيل البؤر بإجراء تقييم سريع وعالي الإنتاجية لفيروس زيكا؛ وتكمن ميزة هذه المقايسة في تقييم الفيروس المُعدي، بينما يتمثل قصورها في احتمالية التأثير بالسُّمّية الناتجة عن أنسجة الأعضاء، مما يقلل من حدّ الكشف. ويُدمج تقييم العيار الفيروسي مع تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي، وباستخدام ضابط نسخ الرنا المؤتلف (recombinant RNA copy control)، يُقيَّم عدد نسخ الجينوم الفيروسي داخل العضو مع بلوغ حدّ كشف منخفض. وبوجه عام، توفر هذه التقنيات طريقة دقيقة وسريعة وعالية الإنتاجية لتحليل عيارات فيروس زيكا في الأنسجة المحيطية والجهاز العصبي المركزي للحيوانات المصابة، ويمكن تطبيقها لتقييم العيارات الفيروسية في أعضاء الحيوانات المصابة بمعظم مسببات الأمراض، بما في ذلك فيروس حمى الضنك.
Reference Key
brien2019isolationjournal Use this key to autocite in the manuscript while using SciMatic Manuscript Manager or Thesis Manager
Authors James D Brien, Mariah Hassert, E Taylor Stone, Elizabeth Geerling, Lillian Cruz-Orengo, Amelia K Pinto
Are you one of these authors? Claim your profile
Journal Journal of visualized experiments : JoVE
Year 2019
DOI
10.3791/59632
URL
Keywords Keywords not found

Citations

No citations found. To add a citation, contact the admin at info@scimatic.org

Comments

No comments yet. Be the first to comment on this article.