frustrated phagocytosis on micro-patterned immune complexes to characterize lysosome movements in live macrophages.

البلعمة المحبطة على معقدات مناعية منقوشة مجهرياً لتوصيف حركات الجسيمات الحالة في الخلايا البلعمية الحية.

Clicks: 289
ID: 200180
2011
Free PDF
Article Quality & Performance Metrics
Overall Quality
Not rated
Combines reader engagement with the AI quality analysis. This article has not been analysed, so there is no overall score — reader engagement is measured and shown alongside.
AI Quality Assessment
Not analyzed
Readership in this journal
Star

Ranked #414 of 644 articles by views in sudebno-meditsinskaia ekspertiza

Most read Least read

Bar heights use a square-root scale. Only the 120 most-read articles are drawn; the journal has 644 in total.

Mint this article as an NFT
Not yet minted

Create a permanent, verifiable on-chain record of this article on the Scimatic Network. The NFT is held in your Journament account, and you can withdraw it to your own wallet at any time.

5 SUSD one-off · no wallet required
Sign in to mint
Abstract
Lysosome mobilization is a key cellular process in phagocytes for bactericidal activities and trans-matrix migration. The molecular mechanisms that regulate lysosome mobilization are still poorly known. Lysosomes are hard to track as they move towards phagosomes throughout the cell volume. In order to anticipate cell regions where lysosomes are recruited to, human and RAW264.7 macrophages were seeded on surfaces that were micro-patterned with immune complexes (ICs) as 4 µm-side squares. Distances between IC patterns were adapted to optimize cell spreading in order to constrain lysosome movements mostly in 2 dimensions. Fc receptors triggered local frustrated phagocytosis, frustrated phagosomes appeared as rings of F-actin dots around the IC patterns as early as 5 minutes after cells made contact with the substratum. Frustrated phagosomes recruited actin-associated proteins (vinculin, paxillin and gelsolin). The fusion of lysosomes with frustrated phagosomes was shown by the release of beta-hexosaminidase and the recruitment of Lamp-1 to frustrated phagosomes. Lysosomes of RAW264.7 macrophages were labeled with cathepsinD-mCherry to visualize their movements towards frustrated phagosomes. Lysosomes saltatory movements were markedly slowed down compared to cells layered on non-opsonized patterns. In addition, the linearity of the trajectories and the frequency and duration of contacts of lysosomes with frustrated phagosomes were measured.¬¬¬¬¬¬¬¬ Using PP2 we showed that instant velocity, pauses and frequency of lysosome/phagosome contacts were at least in part dependent on Src tyrosine kinases. This experimental set-up is the first step towards deciphering molecular mechanisms which are involved in lysosome movements in the cytoplasm (directionality, docking and fusion) using RNA interference, pharmacological inhibition or mutant expression.
تُعد تعبئة الجسيمات الحالة (الليزوسومات) عملية خلوية رئيسية في الخلايا البلعمية لأداء الأنشطة القاتلة للبكتيريا والهجرة عبر المطرق. ولا تزال الآليات الجزيئية التي تنظم تعبئة الجسيمات الحالة غير معروفة بدقة. ويصعب تتبع الجسيمات الحالة أثناء تحركها نحو الجسيمات البلعمية عبر كامل الحجم الخلوي. وللتنبؤ بالمناطق الخلوية التي تُستقطب إليها الجسيمات الحالة، زُرعت بلاعم بشرية وبلاعم من سلالة RAW264.7 على أسطح ذات نقوش مجهرية من المعقدات المناعية (ICs) على هيئة مربعات يبلغ طول ضلعها 4 ميكرومتر. وعُدِّلت المسافات بين أنماط المعقدات المناعية لتحسين انتشار الخلايا بهدف حصر حركة الجسيمات الحالة في بُعدين بصورة رئيسية. حفزت مستقبلات Fcγ حدوث بلعمة محبطة موضعية، وظهرت الجسيمات البلعمية المحبطة على شكل حلقات من نقاط أكتين-F حول أنماط المعقدات المناعية في وقت مبكر لم يتجاوز 5 دقائق من ملامسة الخلايا للركيزة. وجنّدت الجسيمات البلعمية المحبطة البروتينات المرتبطة بالأكتين (الفينكولين، والباكسيلين، والجيلسولين). وثبُت اندماج الجسيمات الحالة مع الجسيمات البلعمية المحبطة من خلال تحرر إنزيم بيتا-هيكسوزامينيداز واستقطاب بروتين Lamp-1 إلى الجسيمات البلعمية المحبطة. كما وُسمت الجسيمات الحالة في بلاعم RAW264.7 بـ cathepsinD-mCherry لرؤية حركاتها نحو الجسيمات البلعمية المحبطة. وتباطأت الحركات القفزية للجسيمات الحالة بصورة ملحوظة مقارنة بالخلايا المزروعة على أنماط غير مقترنة بالطاهيات. وبالإضافة إلى ذلك، قيست خطّية المسارات، وتواتر ومدد تلامس الجسيمات الحالة مع الجسيمات البلعمية المحبطة. وباستخدام مركّب PP2، أظهرنا أن السرعة اللحظية، وفترات التوقف، وتواتر تلامس الجسيمات الحالة/الجسيمات البلعمية اعتمدت، جزئياً على الأقل، على كينازات التيروزين من عائلة Src. ويُعد هذا الإعداد التجريبي خطوة أولى نحو فك شفرة الآليات الجزيئية المسؤولة عن حركة الجسيمات الحالة في السيتوبلازم (الاتجاهية، والرسو، والاندماج) باستخدام تداخل الرنا (RNAi)، أو التثبيط الدوائي، أو التعبير عن الطفرات.
Reference Key
labrousse2011frontiersfrustrated Use this key to autocite in the manuscript while using SciMatic Manuscript Manager or Thesis Manager
Authors ;Arnaud M. Labrousse;Etienne eMeunier;Julien eRecord;Anna eLabernadie;Anna eLabernadie;Amélie eBeduer;Christophe eVieu;Thouraya eBen Safta;Isabelle eMaridonneau-Parini
Journal sudebno-meditsinskaia ekspertiza
Year 2011
DOI
10.3389/fimmu.2011.00051
URL
http://journal.frontiersin.org/Journal/10.3389/fimmu.2011.00051/full
Keywords
macrophages lysosome allergy

Citations

No citations found. To add a citation, contact the admin at info@scimatic.org

Comments

No comments yet. Be the first to comment on this article.